■ 制品內(nèi)容 (50 μl反應(yīng)×200次量)
SYBR® Premix Ex Taq™ (Tli RNaseH Plus) (2×Conc.)*1 1.0 ml × 5 支
ROX Reference Dye (50×Conc.)*2 200 μl × 1 支
ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2 200 μl × 1 支
*1 內(nèi)含TaKaRa Ex Taq® HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,SYBR® Green I 等。
*2 使用在ABI公司的Real Time PCR擴(kuò)增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差。使用ABI 7300 Real-Time PCR System和StepOnePlusTM時(shí)使用ROX Reference Dye;7500和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II。 Stratagene公司的Mx3000P也適用ROX Reference Dye II。使用Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler、Smart Cycler System等Real Time PCR擴(kuò)增儀時(shí)不必使用。Limited Use Label License:[M40], [M57], [L11], [L15], [L46], [P5]
■ 制品說(shuō)明
本制品是采用SYBR® Green I嵌合熒光法進(jìn)行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的最適濃度SYBR®Green I,是一種2×濃度的Premix Type試劑,進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí),PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡(jiǎn)單。制品中使用了抗Taq抗體的的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,與Real Time PCR用最適Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴(kuò)增,大大提高PCR的擴(kuò)增效率,可以進(jìn)行高靈敏度的Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng)。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH(耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí),可以最大限度抑制由于cDNA中殘存mRNA對(duì)PCR反應(yīng)造成的阻害作用。 本制品適合于快速Real Time PCR擴(kuò)增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標(biāo)準(zhǔn)曲線,對(duì)靶基因進(jìn)行準(zhǔn)確定量、檢測(cè),重復(fù)性好,可信度高。
■ 保存
4℃避光保存,避免-20℃凍結(jié)制品。-20℃反復(fù)凍融制品性能可能下降。
■ 試劑盒特長(zhǎng)
適用于Real Time PCR反應(yīng),可以快速、準(zhǔn)確地對(duì)目的基因進(jìn)行檢測(cè)、定量。
2. 在2×濃度的Premix中,預(yù)先混有SYBR® Green I,PCR反應(yīng)液配制時(shí),只需加入模板、引物、滅菌蒸餾水便可進(jìn)行Real Time PCR反應(yīng),操作簡(jiǎn)單方便。
3. DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS,可以進(jìn)行Hot Start法PCR反應(yīng),再與TaKaRa公司獨(dú)自開(kāi)發(fā)的Buffer系統(tǒng)相結(jié)合,具有高擴(kuò)增效率,高擴(kuò)增靈敏度,高擴(kuò)增特異性之特點(diǎn)。
4. 在2×濃度的Premix中,預(yù)先添加了耐熱性RNaseH(Tli RNaseH),可以最大限度抑制以cDNA作為模板進(jìn)行PCR反應(yīng)時(shí),由于cDNA中殘存mRNA對(duì)PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
■ 注意事項(xiàng)
以下為使用本試劑盒時(shí)的注意事項(xiàng),使用前一定認(rèn)真閱讀。
1. 本制品請(qǐng)于4℃避光保存,避免-20℃保存制品。-20℃反復(fù)凍融制品性能可能下降。
2. 使用時(shí)請(qǐng)上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。
3. 本制品中含有熒光染料SYBR® Green I,保存制品或配制PCR反應(yīng)液時(shí)應(yīng)避免強(qiáng)光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請(qǐng)一定使用新的(無(wú)污染的)槍頭、Microtube等,盡量避免污染。