■ 制品內(nèi)容 (50 μl反應(yīng)×200次量)
SYBR® Premix Ex Taq™ (Tli RNaseH Plus) (2×Conc.)*1 1.0 ml × 5 支
ROX Reference Dye (50×Conc.)*2 200 μl × 1 支
ROX Reference Dye II (50×Conc.)*2 200 μl × 1 支
*1 內(nèi)含TaKaRa Ex Taq® HS,dNTP Mixture,Mg2+,Tli RNaseH,SYBR® Green I 等。
*2 使用在ABI公司的Real Time PCR擴增儀上,用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號誤差。使用ABI 7300 Real-Time PCR System和StepOnePlusTM時使用ROX Reference Dye;7500和7500 Fast Real-Time PCR System使用ROX Reference Dye II。 Stratagene公司的Mx3000P也適用ROX Reference Dye II。使用Thermal Cycler Dice Real Time System、LightCycler、Smart Cycler System等Real Time PCR擴增儀時不必使用。Limited Use Label License:[M40], [M57], [L11], [L15], [L46], [P5]
■ 制品說明
本制品是采用SYBR® Green I嵌合熒光法進行Real Time PCR的專用試劑。制品中含有Real Time PCR反應(yīng)的最適濃度SYBR®Green I,是一種2×濃度的Premix Type試劑,進行實驗時,PCR反應(yīng)液的配制十分方便簡單。制品中使用了抗Taq抗體的的Hot Start法用DNA聚合酶TaKaRa Ex Taq HS,與Real Time PCR用最適Buffer組合,可以有效抑制非特異性的PCR擴增,大大提高PCR的擴增效率,可以進行高靈敏度的Real Time PCR擴增反應(yīng)。
另外,本制品中添加了Tli RNaseH(耐熱性RNaseH),以cDNA作為模板進行PCR反應(yīng)時,可以最大限度抑制由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。 本制品適合于快速Real Time PCR擴增反應(yīng),可以在寬廣的定量區(qū)域內(nèi)得到良好的標準曲線,對靶基因進行準確定量、檢測,重復性好,可信度高。
■ 保存
4℃避光保存,避免-20℃凍結(jié)制品。-20℃反復凍融制品性能可能下降。
■ 試劑盒特長
適用于Real Time PCR反應(yīng),可以快速、準確地對目的基因進行檢測、定量。
2. 在2×濃度的Premix中,預先混有SYBR® Green I,PCR反應(yīng)液配制時,只需加入模板、引物、滅菌蒸餾水便可進行Real Time PCR反應(yīng),操作簡單方便。
3. DNA聚合酶使用了改良后的TaKaRa Ex Taq HS,可以進行Hot Start法PCR反應(yīng),再與TaKaRa公司獨自開發(fā)的Buffer系統(tǒng)相結(jié)合,具有高擴增效率,高擴增靈敏度,高擴增特異性之特點。
4. 在2×濃度的Premix中,預先添加了耐熱性RNaseH(Tli RNaseH),可以最大限度抑制以cDNA作為模板進行PCR反應(yīng)時,由于cDNA中殘存mRNA對PCR反應(yīng)造成的阻害作用。
■ 注意事項
以下為使用本試劑盒時的注意事項,使用前一定認真閱讀。
1. 本制品請于4℃避光保存,避免-20℃保存制品。-20℃反復凍融制品性能可能下降。
2. 使用時請上下顛倒輕輕均勻混合,避免起泡,并經(jīng)輕微離心后使用。
3. 本制品中含有熒光染料SYBR® Green I,保存制品或配制PCR反應(yīng)液時應(yīng)避免強光照射。
4. 反應(yīng)液的配制、分裝請一定使用新的(無污染的)槍頭、Microtube等,盡量避免污染。